Методы выделения чистых культур анаэробов.

· Способ Цейсслера. Исследуемый материал сеют штрихами по поверхности плотной среды. Делают анаэробные условия. И инкубируют при 37 градусах 24-72ч. Изолированные колонии анаэробов пересевают на среду контроля стерильности либо среду Китта-Тароцци.

· Способ Вейнберга. Несколько капель исследуемого материал заносят в пробирку с 4-5мл изотонического раствора. Перемешивают запаянным капилляром переносят в пробирку с охлажденным до 45-50 градусов Методы выделения чистых культур анаэробов. сладким агаром, разлитым высочайшим столбиком. После смешивания тем же капилляром засевают еще две пробирки с сладким агаром и стремительно охлаждают под струей воды. Выросшие в глубине колонии пересевают на СКС либо среду Китта-Тароцци.

· Способ Перетца. Готовят разведение материала, как обозначено выше. Содержимое пробирки с подходящим разведением выливают Методы выделения чистых культур анаэробов. в чашечку Петри, на деньке которой на 2-ух палочках лежит стеклянная пластинка 6х6см. среду заливают так, что бы она заполнила место меж пластинкой и дном чашечки. При возникновении роста пластинку поднимают и незапятнанные колонии пересевают.

Незапятнанная культура — это популяция микробов 1-го вида. Для выде­ления незапятанной культуры аэробов употребляют Методы выделения чистых культур анаэробов. способы, основанные на:

1. Механическим разобщением бактериальных клеток;

2. Действии физических и хим причин, оказывающих избира­тельное действие;

3. Возможности неких микробов плодиться в организме.

Способ Дригальского основан на механическом разобщение на поверхности плотной питательной среды бактерий всех видов, входящих в состав исследуе­мого материала.

I шаг.

1. Определение микробного состава исследуемого материала Методы выделения чистых культур анаэробов. (приготовле­ние мазка, расцветка по Граму).

2. Посев в чашечку Петри: одну каплю материала наносят на поверхность МПА и растирают шпателем. Не обжигая шпателя и не набирая нового мате­риала, засевают вторую и третью чашечки.

3. Засеянные чашечки переворачивают ввысь дном и инкубируют в термостате 18-20 часов при температуре 37° С.

II шаг.

1. Микроскопичное Методы выделения чистых культур анаэробов. исследование колонки по величине, форме, расцветке, ха­рактеру поверхности, краев, смеси колонии.

2. Микроскопичное исследование одной исследуемой колонии (приготовле­ние мазка, расцветка по Граму).

3. Оставшуюся часть колонии пересевают в пробирку со скошенным ога-ром.

4. Пробирку инкубируют в термостате 18-20 часов при температуре 37° С. III шаг.

Проверка культуры на чистоту (макроскопическим — однородный рост Методы выделения чистых культур анаэробов., микроскопическим- однородные по морфологическим признакам и тинкториальным признакам клеточки). Идентификация проводится по:

- ферментативным свойствам.

- антигенным свойствам фагочувствительности токсигенности и другим признакам

В практике находят применение последующие физические способы стерилизации.

1. Стерилизация сухим жаром. Стерилизуемый объект нагревают в сушильном шкафу при температуре 180 °С в течение-20-60 мин либо при 200 °С в течение 10-30 мин Методы выделения чистых культур анаэробов.. Сухим жаром стерилизуют стеклянную и фарфоровую посуду, жиры, вазелин, глицерин, термоустойчивые порошки (каолин, стрептоцид, тальк, кальция сульфат, цинка окись и др.).

В сушильных шкафах нельзя стерилизовать водные смеси в склянках, потому что вода при больших температурах преобразуется в пар и склянка может быть разорвана.

2. Стерилизация мокроватым жаром. При использовании Методы выделения чистых культур анаэробов. этого метода стерилизации комбинируются воздействие высочайшей температуры и влажности. Если сухой жар вызывает приемущественно пирогенетическое разрушение микробов, то мокроватый жар — коагуляцию белка, требующую роли воды.

На практике стерилизацию мокроватым жаром создают при температуре 50-150 °С и производят последующими методами.

Кипячение. Этим методом стерилизуют резиновые предметы, хирургический инструментарий Методы выделения чистых культур анаэробов., стеклянную посуду. Использовать кипячение для стерилизации инъекционных смесей не рекомендуется, потому что по эффективности оно существенно уступает стерилизации паром.

Стерилизация текучим паром. Текучим называете» насыщенный водяной пар (без примеси воздуха), имеющий давление 760 мм рт. ст. и температуру 100 °С. Стерилизацию текучим паром производят в паровом стерилизаторе либо автоклаве при 100 °С в течение Методы выделения чистых культур анаэробов. 30-60 мин зависимо от объема раствора. Это один из всераспространенных способов стерилизации инъекционных смесей в аптеках.

Стерилизация паром под давлением (автоклавирование). Осуществляется в автоклавах разной конструкции.. Автоклав представляет собой герметически закрывающийся сосуд, состоящий из толстостенной стерилизационной камеры и кожуха (рис. 36). На автоклаве имеются предохранительный клапан, обеспечивающий выход пара при Методы выделения чистых культур анаэробов. лишнем давлении, и манометр. При каждом автоклаве должны быть аннотация по его эксплуатации и уходу, также паспорт котлонадзора.

Стерилизуемый объект помещают вовнутрь паровой камеры. Водяную камеру подвергают нагреванию. Сначала автоклав нагревают при открытом кране до того времени, пока пар не пойдет сильной сплошной струей и не выпихнет находящийся в Методы выделения чистых культур анаэробов. автоклаве воздух, который существенно понижает теплопроводимость водяного пара (при содержании в водяном паре 5% воздуха она миниатюризируется на 50 %)

3. Дробная стерилизация. При дробной стерилизации объект (обычно аква раствор) нагревают текучим паром при 100 °С в течение 30 мин, потом раствор выдерживают при комнатной температуре 24 ч, после этого опять стерилизуют в тех же Методы выделения чистых культур анаэробов. критериях (30 мин при 100 °С). Описанный цикл повторяют 3- 5 раз. При первом нагревании гибнут вегетативные формы микробов, при следующих — вновь показавшиеся вегетативные формы. Вследствие продолжительности этот метод в аптеках применяется изредка.

4. Пастеризация — однократное нагревание объекта при температуре 60 °С в течение 1 ч либо при температуре 70-80 °С в течение 30 мин. Позволяет убить вегетативные формы Методы выделения чистых культур анаэробов. бактерий (не считая термофильных), но не споры.

5. Тиндализация (дробная пастеризация). При тиндализации объект нагревают при температуре 60-65 °С по 1 ч ежедневно-в течение 5 дней либо при 70-80 °С в течение 3 дней. Это надежный и бережный метод стерилизации термолабильных: фармацевтических веществ. Но вследствие продолжительности он не достаточно подходящ для аптек и в Методы выделения чистых культур анаэробов. последних практически не употребляется.


metodi-zashiti-ot-teplovogo-izlucheniya.html
metodi-znakomstva-i-razrabotki-gruppovih-norm-i-pravil-enerdzhajzeri.html
metodicheskaya-chast-programmi.html